www.chinacdoe.com گهمڻ جي مهرباني.برائوزر جو نسخو توهان استعمال ڪري رهيا آهيو محدود CSS سپورٽ آهي.بهترين تجربي لاءِ، اسان سفارش ڪريون ٿا ته توهان هڪ اپڊيٽ ٿيل برائوزر استعمال ڪريو (يا انٽرنيٽ ايڪسپلورر ۾ مطابقت واري موڊ کي بند ڪريو).ساڳئي وقت ۾، مسلسل حمايت کي يقيني بڻائڻ لاء، اسان سائيٽ کي بغير اسٽائل ۽ جاوا اسڪرپٽ پيش ڪنداسين.
ليب-آن-اي-چپ سسٽم آن-سائيٽ صلاحيتن سان گڏ تيز ۽ صحيح تشخيص جي صلاحيت پيش ڪن ٿا ۽ وسيلن جي محدود سيٽنگن ۾ ڪارآمد آهن جتي بايوميڊيڪل سامان ۽ تربيت يافته پروفيسر موجود نه آهن.بهرحال، هڪ پوائنٽ آف ڪيئر ٽيسٽنگ سسٽم ٺاهڻ جنهن ۾ هڪ ئي وقت ملٽي فنڪشنل ڊسپينسنگ، آن ڊيمانڊ رليز، قابل اعتماد ڪارڪردگي، ۽ ريجينٽس جي ڊگھي مدي واري اسٽوريج لاءِ تمام ضروري خاصيتون آهن.هتي اسان وضاحت ڪريون ٿا هڪ ليور-ايڪٽيوٽيڊ مائڪرو ٽريول سوئچ ٽيڪنالاجي جيڪا ڪنهن به طرف رطوبت کي هٿي ڏئي سگهي ٿي، لاڳو ٿيل هوا جي دٻاءَ کي درست ۽ متناسب جواب ڏئي سگهي ٿي، ۽ اوچتو حرڪتن ۽ وائبريشن جي خلاف مستحڪم رهي ٿي.ٽيڪنالاجي جي بنياد تي، اسان پوليميرس زنجير جي رد عمل واري نظام جي ترقي کي پڻ بيان ڪريون ٿا جيڪو ريٽيجنٽ تعارف، ميڪنگ ۽ رد عمل جي ڪم کي ضم ڪري ٿو، سڀني کي هڪ پروسيس ۾، جيڪو 18 مريضن جي سڀني ڪلينڪل ناک جي نموني لاء "نموني-ان-جواب-آئوٽ" ڪارڪردگي کي پورو ڪري ٿو. انفلوئنزا ۽ 18 انفرادي ڪنٽرول، معياري پوليميرس چين جي رد عمل سان فلورسنس جي شدت جي سٺي مطابقت ۾ (پيئرسن ڪوئفينٽس> 0.9).ٽيڪنالاجي جي بنياد تي، اسان پوليميرس چين جي رد عمل واري نظام جي ترقي کي پڻ بيان ڪريون ٿا جيڪو ريگينٽ تعارف، ميڪنگ ۽ رد عمل جي ڪمن کي ضم ڪري ٿو، سڀني کي هڪ پروسيس ۾، جيڪو 18 مريضن جي سڀني ڪلينڪ نڪ جي نموني لاء "نموني-ان-جواب-آئوٽ" ڪارڪردگي کي پورو ڪري ٿو. انفلوئنزا ۽ 18 انفرادي ڪنٽرولن سان، معياري پوليميرس زنجير جي رد عمل سان فلورسنس جي شدت جي سٺي مطابقت ۾ (پيئرسن ڪوئفينٽس> 0.9).Основываясь на этой технологии, мы также описываем разработку системы полимеразной цепной реакции, которая объединяет функции введения реагентов, смешивания и реакции в одном процессе, что обеспечивает выполнение «образец-в-ответ-выход» для всех клинических образцов из носа от 18 пациентов с Грипп и 18 отдельных контролей, в хорошем соответствии интенсивности флуоресценции со стандартной полимеразной полимеразной полимеразной цепициней تي> 0,9).هن ٽيڪنالاجي جي بنياد تي، اسان پوليميرس زنجير رد عمل واري نظام جي ترقي کي پڻ بيان ڪريون ٿا جيڪو هڪ واحد عمل ۾ انجڻ، ملائڻ، ۽ رد عمل جي ڪم کي گڏ ڪري ٿو، 18 انفلوئنزا جي مريضن جي سڀني ڪلينڪل ناک جي نموني لاء نموني-ان-جواب-آئوٽ کي فعال ڪري ٿو.۽ 18 انفرادي ڪنٽرول، سٺي معاهدي ۾ معياري پوليميرس زنجير رد عمل فلوروسينس شدت سان (پيئرسن جي ڪوئفينٽس> 0.9).هن ٽيڪنالاجي جي بنياد تي، اسان پوليميرس زنجير جي رد عمل واري نظام جي ترقي کي پڻ بيان ڪريون ٿا جيڪو 18 اندر-نالي ناسي جي مريضن جي نمونن مان سڀني ڪلينڪل ناک جي نمونن جو تجزيو ڪرڻ لاء ريگينٽ انجيڪشن، ميڪنگ، ۽ رد عمل جي ڪم کي ضم ڪري ٿو. معياري پوليميرس زنجير ردعمل سان گڏ (پيئرسن جي کوٽائي> 0.9).تجويز ڪيل پليٽ فارم بايوميڊيڪل تجزيي جي قابل اعتماد آٽوميشن جي ضمانت ڏئي ٿو ۽ اهڙيءَ طرح پوائنٽ آف ڪيئر ٽيسٽنگ ڊوائيسز جي هڪ حد تائين ڪمرشلائيزيشن کي تيز ڪري سگهي ٿو.
اڀرندڙ انساني بيماريون، جهڙوڪ 2020 COVID-19 وبائي مرض جنهن لکين ماڻهن جي زندگين جي دعويٰ ڪئي آهي، عالمي صحت ۽ انساني تهذيب لاءِ سنگين خطرو بڻيل آهن.وائرس جي پکيڙ کي ڪنٽرول ڪرڻ ۽ علاج جا نتيجا بهتر ڪرڻ لاءِ بيمارين جي ابتدائي، تيزي ۽ صحيح سڃاڻپ تمام ضروري آهي.مرڪزي ليبز تي ٻڌل هڪ بنيادي تشخيصي ماحولي نظام جتي ٽيسٽ جا نمونا اسپتالن يا تشخيصي ڪلينڪ ڏانهن موڪليا ويندا آهن ۽ ماهرن طرفان هلائي رهيا آهن هن وقت پوري دنيا ۾ تقريبن 5.8 بلين ماڻهن جي رسائي کي محدود ڪري رهيو آهي ، خاص طور تي اهي جيڪي وسيلن جي محدود سيٽنگن ۾ رهن ٿا.جتي قيمتي حياتياتي سامان ۽ قابل ماهرن جي کوٽ آهي.اهڙيءَ طرح، هڪ سستو ۽ صارف-دوست ليب-آن-اي-چپ سسٽم تيار ڪرڻ جي اشد ضرورت آهي جنهن ۾ پوائنٽ آف ڪيئر ٽيسٽنگ (POCT) صلاحيت موجود آهي جيڪا ڊاڪٽرن کي بروقت تشخيصي معلومات فراهم ڪري سگهي ٿي ته جيئن باخبر تشخيص جا فيصلا ڪري سگهن. .۽ علاج 3.
ورلڊ هيلٿ آرگنائيزيشن (ڊبليو ايڇ او) جي هدايتن ۾ چيو ويو آهي ته هڪ مثالي POCT سستي هجڻ گهرجي، صارف دوست (گهٽ ۾ گهٽ تربيت سان استعمال ڪرڻ آسان)، درست (غلط منفي يا غلط مثبت کان بچڻ)، تيز ۽ قابل اعتماد (سٺو ٻيهر قابليت جي خاصيت مهيا ڪرڻ)، ۽ پهچائڻ جي قابل (ڊگھي مدت جي اسٽوريج جي قابل ۽ استعمال ڪندڙن لاءِ آساني سان دستياب) 4.انهن گهرجن کي پورو ڪرڻ لاءِ، POCT سسٽم کي لازمي طور هيٺيون خاصيتون مهيا ڪرڻ گهرجن: دستي مداخلت کي گهٽائڻ لاءِ ورسٽائل ڊوزنگ، صحيح ٽيسٽ جي نتيجن لاءِ ريگينٽ ٽرانسپورٽ کي ماپڻ لاءِ آن ڊيمانڊ ڇڏڻ، ۽ ماحولياتي کمپن کي منهن ڏيڻ لاءِ قابل اعتماد ڪارڪردگي.في الحال، سڀ کان وڏي پيماني تي استعمال ٿيندڙ POCT ڊيوائس آهي ليٽرل فلو اسٽريپ 5,6، جنهن ۾ porous nitrocellulose membranes جي ڪيترن ئي تہن تي مشتمل آهي، جيڪا نموني جي تمام ٿوري مقدار کي اڳتي وڌائيندي، ڪيپيلري قوت طرفان اڳ-غير متحرڪ ريجنٽس سان رد عمل ڪندي.جيتوڻيڪ انهن وٽ گهٽ قيمت، استعمال ۾ آساني، ۽ تيز نتيجن جو فائدو آهي، فلو اسٽريپ تي ٻڌل POCT ڊوائيسز صرف حياتياتي ٽيسٽن لاءِ استعمال ڪري سگھجن ٿيون (مثال طور، گلوڪوز ٽيسٽ 7,8 ۽ حمل جا ٽيسٽ 9,10) بنا ڪنهن گھڻن مرحلن جي تجزين جي.رد عمل (مثال طور ڪيترن ئي ريجينٽس جو لوڊ ڪرڻ، ملائڻ، ملٽي پلڪسنگ).ان کان علاوه، ڊرائيونگ قوتون جيڪي سيال جي حرڪت کي ڪنٽرول ڪن ٿيون (يعني، ڪيپيلري قوتون) سٺي استحڪام مهيا نه ڪن، خاص طور تي بيچ جي وچ ۾، نتيجي ۾ خراب پيداواري صلاحيت 11 ۽ بعد ۾ وهڪري جي بينڊ بنيادي طور تي سٺي ڳولڻ لاء ڪارائتو آهي 12,13.
مائيڪرو- ۽ نانوسڪيل تي وڌايل پيداواري صلاحيتن 14,15,16,17 جي مقدار جي ماپن لاءِ مائڪرو فلائيڊڪ POCT ڊوائيسز جي ترقي لاءِ موقعا پيدا ڪيا آهن.انٽرفيس 18، 19 ۽ چينلز جي جاميٽري 20، 21، 22 جي خاصيتن کي ترتيب ڏيڻ سان، انهن ڊوائيسز جي ڪيپيلري قوت ۽ وهڪري جي شرح کي ڪنٽرول ڪري سگهجي ٿو.بهرحال، انهن جي اعتبار، خاص طور تي انتهائي گندي مائع لاء، پيداوار جي غلطي، مادي خرابين، ۽ ماحولياتي کمپن جي حساسيت جي ڪري ناقابل قبول رهي ٿي.ان کان علاوه، جيئن ته مائع-گيس انٽرفيس تي ڪيپيلري وهڪري ٺاهي وئي آهي، ڪو به اضافي وهڪرو متعارف نه ٿي سگهي، خاص طور تي مائع سان مائڪرو فلائيڊڪ چينل ڀرڻ کان پوء.تنهن ڪري، وڌيڪ پيچيده ڳولڻ لاء، نموني انجڻ جي ڪيترن ئي مرحلن کي انجام ڏيڻ گهرجي 24,25.
microfluidic ڊوائيسز ۾، سينٽرفيوگل مائڪرو فلائيڊڪ ڊوائيسز هن وقت POCT26,27 لاءِ بهترين حلن مان هڪ آهن.ان جي ڊرائيونگ ميڪانيزم فائدي ۾ آهي ته ڊرائيونگ فورس کي گردش جي رفتار کي ترتيب ڏيڻ سان ڪنٽرول ڪري سگهجي ٿو.بهرحال، نقصان اهو آهي ته سينٽرفيوگل قوت هميشه ڊوائيس جي ٻاهرئين ڪنڊ ڏانهن هدايت ڪئي وئي آهي، وڌيڪ پيچيده تجزين لاء گهربل گهڻن قدمن جي رد عمل کي لاڳو ڪرڻ ڏکيو آهي.جيتوڻيڪ اضافي ڊرائيونگ قوتون (مثال طور ڪيپيلريز 28، 29 ۽ ٻيا ڪيترائي 30، 31، 32، 33، 34، 35) سينٽرفيوگل فورس کان علاوه ملٽي فنڪشنل ڊوزنگ لاءِ متعارف ڪرايا ويا آهن، غير متوقع مائع منتقلي اڃا به ٿي سگهي ٿي ڇاڪاڻ ته اهي اضافي قوتون عام طور تي حڪم آهن. سينٽرفيوگل قوت کان گھٽ جي شدت، انهن کي صرف ننڍن آپريٽنگ حدن تي اثرائتو بڻائي ٿو يا مائع ڇڏڻ سان طلب تي دستياب ناهي.سينٽريفيوگل مائڪرو فلائيڊڪس ۾ نيوميٽڪ ميپيپليشنز کي شامل ڪرڻ جهڙوڪ سينٽريفيوگل ڪائنيٽڪ طريقا 36، 37، 38، ٿرموپينيميٽڪ طريقا 39 ۽ فعال نيوميٽڪ طريقا 40 هڪ پرڪشش متبادل ثابت ٿيا آهن.counterfugodynamic طريقه ڪار سان، هڪ اضافي گفا ۽ ڳنڍڻ وارا مائڪرو چينلز ٻنهي خارجي ۽ اندروني عمل لاءِ ڊوائيس ۾ ضم ڪيا ويا آهن، جيتوڻيڪ ان جي پمپنگ ڪارڪردگي (75٪ کان 90٪ جي حد ۾) گهڻو ڪري پمپنگ سائيڪلن جي تعداد ۽ ويسڪوسيٽي تي منحصر آهي. مائع جو.Thermopneumatic طريقي ۾، ليٽڪس جھلي ۽ سيال جي منتقلي چيمبر خاص طور تي انٽ کي سيل ڪرڻ يا ٻيهر کولڻ لاءِ ٺاھيو ويو آھي جڏھن پھچي ٿيل هوا جي مقدار کي گرم يا ٿڌو ڪيو ويندو آھي.جڏهن ته، حرارتي / کولنگ سيٽ اپ سست ردعمل جي مسئلن کي متعارف ڪرايو آهي ۽ ان جي استعمال کي محدود ڪري ٿو thermosensitive assays (مثال طور، پوليميرس زنجير ردعمل (PCR) ايمپليڪشن).هڪ فعال نيوميٽڪ طريقي سان، آن ڊيمانڊ ڇڏڻ ۽ اندريون حرڪتون حاصل ڪيون وينديون آهن هڪ ئي وقت ۾ مثبت دٻاءُ ۽ تيز رفتار موٽرز ذريعي صحيح طور تي ملندڙ گردش واري رفتار جي ايپليڪيشن ذريعي.ٻيا ڪامياب طريقا آهن صرف نيوميٽڪ ايڪٽيوٽر استعمال ڪندي (مثبت پريشر 41، 42 يا منفي پريشر 43) ۽ عام طور تي بند ٿيل والو ڊيزائن.نيوميٽڪ چيمبر ۾ مسلسل دٻاءُ کي لاڳو ڪرڻ سان، مائع کي پريسٽالٽ طور اڳيان پمپ ڪيو ويندو آهي، ۽ عام طور تي بند ٿيل والو peristalsis جي ڪري مائع جي پٺڀرائي کي روڪيندو آهي، اهڙيءَ طرح پيچيده مائع آپريشن کي محسوس ڪندي.بهرحال، في الحال صرف محدود تعداد ۾ مائڪرو فلائيڊڪ ٽيڪنالاجيون آهن جيڪي هڪ واحد POCT ڊوائيس ۾ پيچيده مائع آپريشن ڪري سگهن ٿيون، جن ۾ ملٽي فنڪشنل ڊسپينسنگ، آن ڊيمانڊ رليز، قابل اعتماد ڪارڪردگي، ڊگهي مدي واري اسٽوريج، اعلي ويسڪوسيٽي مائع جي سنڀال، ۽ قيمتي-مؤثر پيداوار.سڀ هڪ ئي وقت ۾.گھڻن قدمن واري فنڪشنل آپريشن جو فقدان پڻ ان سببن مان ٿي سگھي ٿو ته صرف چند تجارتي POCT پراڊڪٽس جھڙوڪ ڪيفيڊ، بنڪس، ويسبي، ڪوباس ليٽ، ۽ رونڊا ڪاميابيءَ سان اڄ تائين اوپن مارڪيٽ تي متعارف ڪرايا ويا آھن.
هن مقالي ۾، اسان هڪ نيوميٽڪ مائڪرو فلائيڊڪ ايڪٽيوٽر جي تجويز پيش ڪندا آهيون سائي رنگ جي مائڪرو سوئچ ٽيڪنالاجي (FAST) جي بنياد تي.FAST سڀني ضروري ملڪيتن کي گڏ ڪري ٿو هڪ ئي وقت ۾ ريجينٽس جي وسيع رينج لاءِ مائڪرو لٽر کان مليلٽر تائين.FAST لچڪدار جھلي، ليور ۽ بلاڪ تي مشتمل آھي.ايئر پريشر جي درخواست کان سواء، جھلي، ليور ۽ بلاڪ مضبوط طور تي بند ڪري سگھجن ٿيون ۽ اندر مائع کي ڊگھي وقت تائين ذخيرو ڪري سگھجي ٿو.جڏهن مناسب دٻاءُ لاڳو ڪيو وڃي ٿو ۽ ليور جي ڊيگهه کي ترتيب ڏنو وڃي ٿو، ڊافرام کي وڌايو وڃي ٿو ۽ ليور کي کليل پوزيشن ڏانهن ڌڪيندو آهي، جنهن جي ذريعي سيال گذري ٿو.هي اجازت ڏئي ٿو مائع جي گھڻ-فعلي ماپنگ کي cascade ۾، هڪ ئي وقت، ترتيب وار يا چونڊيل انداز ۾.
اسان انفلوئنزا A ۽ B وائرسز (IAV ۽ IBV) جي سڃاڻپ لاءِ FAST استعمال ڪندي هڪ PCR سسٽم تيار ڪيو آهي.اسان 102 ڪاپيون / ايم ايل جي سڃاڻپ جي گھٽ حد (LOD) حاصل ڪئي، اسان جي ملٽي پلڪس جي امتحان IAV ۽ IBV لاءِ مخصوصيت ڏيکاري ٿي ۽ انفلوئنزا وائرس جي پيٽو ٽائپنگ جي اجازت ڏني وئي.18 مريضن ۽ 18 صحتمند ماڻهن مان نڪ جي swab نموني کي استعمال ڪندي ڪلينڪل جاچ جا نتيجا معياري RT-PCR (Pearson coefficients> 0.9) سان فلورسنس جي شدت ۾ سٺي مطابقت ڏيکاري ٿو.18 مريضن ۽ 18 صحتمند ماڻهن مان نڪ جي swab نموني کي استعمال ڪندي ڪلينڪل جاچ جا نتيجا معياري RT-PCR (Pearson coefficients> 0.9) سان فلورسنس جي شدت ۾ سٺي مطابقت ڏيکاري ٿو.Результаты клинических испытаний с использованием образца мазка из носа от 18 пациентов и 18 здоровых лица показатевых нсивности флуоресценции стандартной ОТ-ПЦР (Coэффициенты Пирсона > 0,9).18 مريضن ۽ 18 صحتمند ماڻهن مان نڪ جي swab نموني استعمال ڪندي ڪلينڪل تجربن جا نتيجا معياري RT-PCR (Pearson’s coefficients > 0.9) جي فلورسنس شدت جي وچ ۾ سٺو معاهدو ڏيکارين ٿا.0.9) .. ....... Результаты клинических испытаний с использованием образцов назальных мазков от 18 пациентов и 18 здоровых пациентов ду интенсивностью флуоресценции и стандартной ОТ-ПЦР (Coэфициент Пирсона > 0,9).18 مريضن ۽ 18 صحتمند ماڻهن کان نڪ جي سواب جي نموني استعمال ڪندي ڪلينڪل تجربن جا نتيجا فلورسنس جي شدت ۽ معياري RT-PCR (پيئرسن جي کوٽ> 0.9) جي وچ ۾ سٺو معاهدو ڏيکاريا ويا.FAST-POCT ڊيوائس جي اندازي مطابق مواد جي قيمت لڳ ڀڳ US$1 (ضمني جدول 1) آهي ۽ وڏي پيماني تي پيداواري طريقن (مثال طور انجيڪشن مولڊنگ) استعمال ڪندي ان کي وڌيڪ گھٽائي سگھجي ٿو.حقيقت ۾، FAST-based POCT ڊوائيسز ۾ WHO پاران ڏنل سڀ ضروري خاصيتون آهن ۽ نئين بايو ڪيميڪل ٽيسٽنگ طريقن سان مطابقت رکن ٿيون جهڙوڪ پلازما تھرمل سائيڪلنگ 44، ايمپليفڪيشن فري اميونواساسي 45 ۽ نانوبوڊي فنڪشنلائيزيشن ٽيسٽ 46 جيڪي POCT سسٽم جي پٺ جي بون آهن.امڪان.
انجير تي.1a FAST-POCT پليٽ فارم جي جوڙجڪ کي ڏيکاري ٿو، جيڪو چار مائع چيمبرن تي مشتمل آھي: ھڪڙو اڳ-اسٽوريج چيمبر، ھڪڙو ميڪنگ چيمبر، ھڪڙو ردعمل چيمبر، ۽ ھڪڙي فضول چيمبر.فلو فلو ڪنٽرول جي ڪنجي FAST ڊيزائن آهي (جنهن ۾ لچڪدار جھلي، ليور ۽ بلاڪ شامل آهن) اڳي اسٽوريج چيمبر ۽ ميڪنگ چيمبر ۾ واقع آهن.هڪ نمونياتي طريقي سان عمل ڪرڻ واري طريقي جي طور تي، FAST ڊزائين درست فلو فلو ڪنٽرول مهيا ڪري ٿي، جنهن ۾ بند/اوپن سوئچنگ، ورسٽائل ڊاسنگ، آن ڊيمانڊ فلوئڊ ڇڏڻ، قابل اعتماد آپريشن (مثال طور، ماحولياتي کمپن جي غير حساسيت)، ۽ ڊگهي مدي واري اسٽوريج شامل آهن.FAST-POCT پليٽ فارم چار تہن تي مشتمل آھي: ھڪڙي پٺتي پرت، ھڪڙي لچڪدار فلمي پرت، ھڪڙي پلاسٽڪ فلم جي پرت، ۽ ھڪڙي ڍڪڻ واري پرت، جيئن تصوير 1b ۾ وڌايو ويو آھي (پڻ تفصيل سان ڏيکاريل آھي ضمني انگ اکر S1 ۽ S2 ۾. ).سڀئي چينل ۽ فلوئڊ ٽرانسپورٽ چيمبرز (جهڙوڪ پري اسٽوريج ۽ رد عمل جا چيمبر) PLA (polylactic acid) ذيلي ذخيري ۾ 0.2 ملي ميٽر (ٿلهي حصو) کان 5 ملي ميٽر ٿلها هوندا آهن.لچڪدار فلم جو مواد 300 µm ٿلهو PDMS آهي جيڪو آسانيءَ سان وڌي ٿو جڏهن هوا جو دٻاءُ لاڳو ٿئي ٿو ان جي ”ٿلهي ٿلهي“ ۽ لوچ جي گهٽ ماڊلس (اٽڪل 2.25 MPa47).polyethylene فلم جي پرت polyethylene terephthalate (PET) مان ٺهيل آهي 100 µm جي ٿلهي سان لچڪدار فلم کي هوا جي دٻاءَ جي ڪري وڌيڪ خراب ٿيڻ کان بچائڻ لاءِ.چيمبرن سان ملندڙ جلندڙ، ذيلي پرت ۾ ليور شامل آهن ڍڪيل پرت سان ڳنڍيل آهن (PLA جو ٺهيل) مائع جي وهڪري کي ڪنٽرول ڪرڻ لاء ڪنگڻ ذريعي.لچڪدار فلم کي ڊبل رخا چپپڻ واري ٽيپ (ARseal 90880) استعمال ڪندي پٺتي جي پرت تي چمڪيو ويو ۽ پلاسٽڪ فلم سان ڍڪيو ويو.ٽن تہن کي گڏ ڪيو ويو سبسٽرٽ تي ٽي-ڪلپ ڊيزائن کي استعمال ڪندي ڪپڙا پرت ۾.T-clamp ٻن پيرن جي وچ ۾ خال آھي.جڏهن ڪلپ کي نالي ۾ داخل ڪيو ويو ته، ٻئي ٽنگون ٿوريون جھڪيون، پوءِ پنهنجي اصل حالت ۾ موٽي آيون ۽ لڪ ۽ پٺي کي مضبوطيءَ سان جڪڙيو ويو جيئن اهي نالي مان گذريا (ضمني شڪل S1).چار تہه وري ڪنيڪٽر استعمال ڪندي گڏ ڪيا ويا آھن.
پليٽ فارم جي اسڪيمي ڊاگرام FAST جي مختلف فنڪشنل حصن ۽ خاصيتن کي بيان ڪري ٿي.ب FAST-POCT پليٽ فارم جو وڌايل آريگرام.c يو ايس جي چوٿين ڊالر جي سڪن جي اڳيان پليٽ فارم جو فوٽو.
FAST-POCT پليٽ فارم جو ڪم ڪندڙ ميڪانيزم تصوير 2 ۾ ڏيکاريو ويو آهي. اهم جزا بنيادي پرت تي بلاڪ ۽ ڪپڙا پرت تي ڪنگڻ آهن، جنهن جي نتيجي ۾ هڪ مداخلت واري ڊيزائن جي نتيجي ۾ جڏهن چار پرت کي ٽي-شڪل استعمال ڪندي گڏ ڪيو ويندو آهي. .جڏهن هوا جو دٻاءُ نه لڳايو ويندو آهي (fig. 2a)، مداخلت جي فٽ ٽنگ کي موڙڻ ۽ خراب ڪرڻ جو سبب بڻائيندو آهي، ۽ هڪ سيلنگ فورس ليور ذريعي لاڳو ڪئي ويندي آهي ته جيئن بلاڪ جي خلاف لچڪدار فلم کي دٻايو وڃي، ۽ سيل جي گفا ۾ مائع جي وضاحت ڪئي ويندي آهي. هڪ بند رياست جي طور تي.اهو ياد رکڻ گهرجي ته هن حالت ۾، ليور ٻاهران جھڪيل آهي، جيئن تصوير 2a ۾ پاسي واري ڏيک ۾ ڏيکاريل آهي.جڏهن هوا جي فراهمي ڪئي ويندي آهي (تصوير 2b)، لچڪدار جھلي ٻاهران ڍانچي ڏانهن وڌي ٿي ۽ ليور کي مٿي کي دٻائي ٿي، اهڙيءَ طرح ليور ۽ بلاڪ جي وچ ۾ هڪ خال کولي ٿو ته جيئن ايندڙ چيمبر ۾ فلوئيڊ وهي وڃي، جنهن کي کليل حالت طور بيان ڪيو ويو آهي. .هوا جو دٻاءُ ڇڏڻ کان پوءِ، ليور پنهنجي اصل پوزيشن ڏانهن واپس اچي سگهي ٿو ۽ ڪنگڻ جي لچڪ جي ڪري تنگ رهي.ليور تحريڪن جا وڊيوز پيش ڪيا ويا آهن ضمني فلم S1 ۾.
A. بند ٿيل اسڪيمي ڊاگرام ۽ تصويرون.دٻاء جي غير موجودگي ۾، ليور بلاڪ جي خلاف جھلي کي دٻائي ٿو، ۽ مائع کي بند ڪيو ويو آھي.ب سٺي حالت ۾.جڏهن دٻاء لاڳو ٿئي ٿو، جھلي وڌائي ٿي ۽ ليور کي زور ڏئي ٿو، تنهنڪري چينل کلي ٿو ۽ سيال وهي سگهي ٿو.c نازڪ دٻاء جي خصوصيت جو اندازو لڳايو.خصوصيت جي طول و عرض ۾ ليور جي ڊگھائي (L)، سلائڊر ۽ ٽنگ جي وچ ۾ فاصلو (l) ۽ ليور جي ٿلهي جي ٿلهي (t).Fs ٿلهي پوائنٽ B تي ڪمپيڪشن قوت آهي. q ليور تي هڪجهڙائي سان ورهايل لوڊ آهي.Tx * ٽنگيل ليور پاران ٺاهيل ٽوڪ جي نمائندگي ڪري ٿو.نازڪ دٻاء اهو دٻاء آهي جيڪو ليور کي بلند ڪرڻ ۽ سيال جي وهڪري کي ٺاهڻ جي ضرورت آهي.ڊي نظرياتي ۽ تجرباتي نتيجا نازڪ دٻاء ۽ عنصر جي سائيز جي وچ ۾ تعلق.n = 6 آزاد تجربا ڪيا ويا ۽ ڊيٽا ڏيکاريا ويا آهن ± معياري انحراف.خام ڊيٽا خام ڊيٽا فائلن جي طور تي پيش ڪيا ويا آهن.
بيم جي نظريي تي ٻڌل هڪ تجزياتي ماڊل نازڪ پريشر پي سي جي انحصار جو تجزيو ڪرڻ لاءِ تيار ڪيو ويو آهي جنهن تي جاميٽري پيرا ميٽرز تي خال کلي ٿو (مثال طور، ايل ليور جي ڊگھائي آهي، l آهي بلاڪ ۽ جي وچ ۾ فاصلو. hinge, S ليور آهي مائع t سان رابطي واري علائقي ليور پروٽروشن جي ٿلهي آهي، جيئن تصوير 2c ۾ ڏيکاريل آهي).جيئن ته ضمني نوٽس ۽ ضمني شڪل S3 ۾ تفصيل سان بيان ڪيو ويو آهي، خال تڏهن کلي ٿو جڏهن \({P}_{c}\ge \frac{2{F}_{s}l}{SL}\)، جتي Fs ٽاڪ آهي \ ({T}_{x}^{\ast}(={F}_{s}l)\) مداخلت سان جڙيل قوتن کي ختم ڪرڻ ۽ ڪنگڻ کي موڙڻ جو سبب بڻائڻ.تجرباتي جواب ۽ تجزياتي ماڊل سٺو معاهدو ڏيکاري ٿو (تصوير 2d)، ڏيکاري ٿو ته نازڪ دٻاءُ پي سي وڌندو آهي ٽي/ايل وڌڻ سان ۽ L گھٽجڻ سان، جنهن کي آسانيءَ سان واضح ڪيو ويو آهي ڪلاسيڪل بيم ماڊل، يعني ٽوڪ وڌي ٿو ٽي/لفٽ سان. .ان ڪري، اسان جو نظرياتي تجزيو واضح طور تي ڏيکاري ٿو ته نازڪ دٻاء کي مؤثر طور تي ڪنٽرول ڪري سگهجي ٿو ليور جي ڊيگهه L ۽ t/l تناسب کي ترتيب ڏيڻ سان، جيڪو FAST-POCT پليٽ فارم جي ڊيزائن لاء هڪ اهم بنياد فراهم ڪري ٿو.
FAST-POCT پليٽ فارم ملٽي فنڪشنل ڊسپينسنگ مهيا ڪري ٿو (شڪل 3a ۾ inset ۽ تجربي سان ڏيکاريل آهي)، جيڪا ڪامياب POCT جي سڀ کان اهم خصوصيت آهي، جتي فلوئيڊ ڪنهن به طرف ۽ ڪنهن به ترتيب ۾ وهي سگهن ٿا (cascade، simultaneous، sequential) يا منتخب ملٽي چينل. پهچائڻ- dosing فنڪشن.انجير تي.3a (i) هڪ cascaded dosing موڊ ڏيکاري ٿو جنهن ۾ ٻه يا وڌيڪ چيمبرز بلاڪ استعمال ڪندي cascaded آهن مختلف reactants کي الڳ ڪرڻ ۽ هڪ ليور کليل ۽ بند رياستن کي ڪنٽرول ڪرڻ لاءِ.جڏهن دٻاء لاڳو ڪيو ويندو آهي، مائع مٿي کان هيٺئين چيمبر ڏانهن cascade انداز ۾ وهندو آهي.اهو ياد رکڻ گهرجي ته cascade چيمبرن کي گندي ڪيميائي يا خشڪ ڪيميائي سان ڀريو وڃي ٿو جهڙوڪ لائوفيلائيز پائوڊر.تصوير 3a(i) ۾ تجربي ۾، مٿئين چيمبر مان ڳاڙهي مس نيري رنگ جي پائوڊر (ڪاپر سلفيٽ) سان گڏ ٻئي چيمبر ۾ وهندي آهي ۽ جڏهن هيٺئين چيمبر تائين پهچندي آهي ته ڪارو نيرو ٿي ويندو آهي.اهو پڻ ڏيکاري ٿو ته ڪنٽرول دٻاء سيال لاء پمپ ڪيو پيو وڃي.اهڙي طرح، جڏهن هڪ ليور ٻن چيمبرن سان ڳنڍيل آهي، اهو هڪ ئي وقت انجيڪشن موڊ بڻجي ويندو آهي، جيئن تصوير ۾ ڏيکاريل آهي.3a (ii)، جنهن ۾ مائع هڪجهڙائي سان ورهائي سگهجي ٿو ٻن يا وڌيڪ چيمبرن تي جڏهن دٻاء لاڳو ٿئي ٿي.جيئن ته نازڪ دٻاء جو دارومدار ليور جي ڊيگهه تي آهي، ليور جي ڊيگهه ترتيب ڏئي سگهجي ٿي هڪ ترتيب وار انجڻ جي نموني حاصل ڪرڻ لاء جيئن تصوير ۾ ڏيکاريل آهي.3a (iii).هڪ ڊگهو ليور (نازڪ پريشر Pc_long سان) چيمبر بي سان ڳنڍيل هو ۽ هڪ ننڍو ليور (نازڪ پريشر Pc_short> Pc_long سان) چيمبر A سان ڳنڍيل هو. جيئن پريشر P1 (Pc_long <P1 <Pc_short) لاڳو ڪيو ويو، صرف ڳاڙهي ۾ مائع چيمبر B ڏانهن وهي سگهي ٿو ۽ جڏهن دٻاءُ وڌو ويو ته P2 (> Pc_short)، نيرو مائع چيمبر A ڏانهن وهي سگهي ٿو. هي ترتيب وار انجيڪشن موڊ مختلف مائعن تي لاڳو ٿئي ٿو جيڪي ترتيب سان انهن جي لاڳاپيل چيمبر ڏانهن منتقل ڪن ٿا، جيڪو هڪ ڪامياب POCT لاءِ اهم آهي. ڊوائيس.هڪ ڊگهو ليور (نازڪ پريشر Pc_long سان) چيمبر بي سان ڳنڍيل هو ۽ هڪ ننڍو ليور (نازڪ پريشر Pc_short> Pc_long سان) چيمبر A سان ڳنڍيل هو. جيئن پريشر P1 (Pc_long
ملٽي فنڪشنل اسائنمينٽ جو هڪ مثال، يعني (i) cascading، (ii) هڪ ئي وقت، (iii) ترتيب وار، ۽ (iv) چونڊ تفويض.وکر انهن چار ورهائڻ واري طريقن جي ڪم جي فلو ۽ پيٽرولن جي نمائندگي ڪن ٿا.b ڊيونائيزڊ پاڻي ۽ ايٿانول ۾ ڊگھي مدت جي اسٽوريج ٽيسٽ جا نتيجا.n = 5 آزاد تجربا ڪيا ويا ۽ ڊيٽا ڏيکاريا ويا ± sd c.استحڪام ٽيسٽ جو مظاهرو جڏهن FAST ڊوائيس ۽ ڪيپيلري والو (CV) ڊوائيس (i) جامد ۽ (ii) متحرڪ رياستن ۾ هئا.(iii) حجم بمقابلہ وقت FAST ۽ CV ڊوائيسز لاءِ مختلف ڪنولر فريڪوئنسيز تي.d (i) فاسٽ ڊيوائس ۽ (ii) سي وي ڊيوائس جي مطالبي تي ٽيسٽ جا نتيجا شايع ڪرڻ.(iii) FAST ۽ CV ڊوائيسز لاء حجم ۽ وقت جي وچ ۾ لاڳاپا وقفي واري دٻاء واري موڊ کي استعمال ڪندي.سڀ اسڪيل بار، 1 سينٽي.خام ڊيٽا خام ڊيٽا فائلن جي طور تي مهيا ڪيل آهن.
ريجينٽس جو ڊگھي مدي وارو ذخيرو هڪ ڪامياب POCT ڊوائيس جي هڪ ٻي اهم خصوصيت آهي جيڪا غير تربيت يافته اهلڪارن کي ڪيترن ئي ريجنٽس کي سنڀالڻ جي اجازت ڏيندو.جڏهن ته ڪيتريون ئي ٽيڪنالاجيون ڊگھي مدي واري اسٽوريج لاءِ پنهنجون صلاحيتون ڏيکارينديون آهن (مثال طور، 35 مائڪرو ڊسپينسر، 48 بليسٽر پيڪ، ۽ 49 اسٽڪ پيڪ)، پيڪيج کي گڏ ڪرڻ لاءِ هڪ وقف وصول ڪرڻ واري خاني جي ضرورت هوندي آهي، جيڪا قيمت ۽ پيچيدگي وڌائي ٿي؛ان کان علاوه، اهي اسٽوريج ميڪانيزم جي اجازت نه ڏيندا آهن آن ڊيمانڊ ڊسپينسنگ ۽ نتيجي ۾ ريجينٽ جي ضايع ٿيڻ سبب پيڪنگنگ ۾ بچيل شيون.ڊگهي مدي واري اسٽوريج جي صلاحيت جي تصديق ڪئي وئي هڪ تيز زندگي ٽيسٽ ذريعي CNC-مشين PMMA مواد استعمال ڪندي ان جي معمولي خرابي ۽ گئس جي گھمڻ جي مزاحمت جي ڪري (ضمني شڪل S5).ٽيسٽ اپريٽس کي 9 ڏينهن تائين 65 ° C تي deionized پاڻي (deionized water) ۽ 70% ethanol (simulating volatile reagents) سان ڀريو ويو.ٻئي deionized پاڻي ۽ ethanol المونيم ورق استعمال ڪندي ذخيرو ڪيو ويو مٿي کان رسائي بلاڪ ڪرڻ لاء.50,51 ادب ۾ رپورٽ ڪيل Arrhenius مساوات ۽ دخول چالو توانائي کي حقيقي وقت جي برابري جي حساب سان استعمال ڪيو ويو.انجير تي.3b 9 ڏينهن لاءِ 65°C تي رکيل 5 نمونن لاءِ سراسري وزن گھٽائڻ جا نتيجا ڏيکاري ٿو، برابر 0.30% deionized water ۽ 0.72% 70% ethanol لاءِ 2 سالن دوران 23°C تي.
انجير تي.3c کمپن ٽيسٽ ڏيکاري ٿو.جيئن ته ڪيپيلري والو (CV) موجوده POCT28,29 ڊوائيسز ۾ سڀ کان وڌيڪ مشهور فلوئڊ سنڀالڻ جو طريقو آهي، هڪ CV ڊيوائس 300 µm ويڪر ۽ 200 µm ڊيپ مقابلي لاءِ استعمال ڪيو ويو.اهو ڏسي سگهجي ٿو ته جڏهن ٻئي ڊوائيس اسٽيشنري رهندا آهن، FAST-POCT پليٽ فارم سيل ۾ سيال ۽ سي وي ڊيوائس ۾ سيال چينل جي اوچتو توسيع جي ڪري بند ٿي ويندا آهن، جيڪو ڪيپيلري قوتن کي گھٽائي ٿو.جڏهن ته، جيئن مداري وائبريٽر جي ڪوئلي فریکوئنسي وڌي ٿي، تيئن FAST-POCT پليٽ فارم ۾ فلوئڊ بند رهي ٿو، پر CV ڊيوائس ۾ فلوئيڊ هيٺين چيمبر ۾ وهي ٿو (ڏسو اضافي فلم S3 پڻ).اهو مشورو ڏئي ٿو ته FAST-POCT پليٽ فارم جي خراب ٿيل ڪنگڻ کي چيمبر ۾ مائع کي مضبوط طور تي بند ڪرڻ لاء ماڊل تي هڪ مضبوط ميخانياتي قوت لاڳو ڪري سگهي ٿي.جڏهن ته، CV ڊوائيسز ۾، مائع برقرار رکيو ويندو آهي ڇاڪاڻ ته جامد، هوا ۽ مائع مرحلن جي وچ ۾ توازن، عدم استحڪام پيدا ڪرڻ، ۽ وائبريشن توازن کي خراب ڪري سگهي ٿو ۽ غير متوقع وهڪري جي رويي جو سبب بڻائين.FAST-POCT پليٽ فارم جو فائدو اهو آهي ته اهو قابل اعتماد ڪارڪردگي فراهم ڪري ٿو ۽ کمپن جي موجودگي ۾ ناڪامي کان بچي ٿو جيڪي عام طور تي پهچائڻ ۽ آپريشن دوران ٿينديون آهن.
FAST-POCT پليٽ فارم جي هڪ ٻي اهم خصوصيت ان جي آن ڊيمانڊ رليز آهي، جيڪا مقداري تجزيي لاءِ هڪ اهم گهرج آهي.انجير تي.3d FAST-POCT پليٽ فارم ۽ سي وي ڊيوائس جي آن ڊيمانڊ ڇڏڻ جو مقابلو ڪري ٿو.انجير کان.3d (iii) اسان ڏسون ٿا ته فاسٽ ڊوائيس پريشر سگنل کي جلدي جواب ڏئي ٿو.جڏهن FAST-POCT پليٽ فارم تي دٻاء لاڳو ڪيو ويو، سيال وهندو هو، جڏهن دٻاء جاري ڪيو ويو، وهڪري کي فوري طور تي بند ڪيو ويو (Fig. 3d(i)).اهو عمل هنج جي جلدي لچڪدار واپسي جي وضاحت ڪري سگهجي ٿو، جيڪو ليور کي بلاڪ جي خلاف دٻائي ٿو، چيمبر کي بند ڪري ٿو.بهرحال، سي وي ڊيوائس ۾ وهڻ جاري رهيو، آخرڪار دٻاءُ ڇڏڻ کان پوءِ تقريبن 100 μl جي غير متوقع سيال مقدار جي نتيجي ۾ (شڪل 3d(ii) ۽ ضمني مووي S4).اها وضاحت ڪري سگهجي ٿي ته پهرين انجيڪشن کان پوءِ سي وي جي مڪمل ويٽنگ تي ڪيپيلري پننگ اثر جي غائب ٿيڻ سان.
ساڳئي ڊوائيس ۾ مختلف ويٽيبلٽي ۽ ويسڪوسيٽي جي مائع کي سنڀالڻ جي صلاحيت POCT ايپليڪيشنن لاء هڪ چئلينج رهي ٿي.خراب ويٽيبلٽي چينلن ۾ لڪ يا ٻين غير متوقع وهڪري جي رويي جو سبب بڻجي سگهي ٿي، ۽ ضمني سامان جهڙوڪ وورٽيڪس ميڪر، سينٽريفيوجز ۽ فلٽر اڪثر ڪري تمام گهڻي ويسڪ مائع تيار ڪرڻ جي ضرورت پوندي آهي 52.اسان نازڪ دٻاء ۽ سيال جي ملڪيت جي وچ ۾ تعلق جي جانچ ڪئي (وڏي حد تائين ويٽبلٽي ۽ ويسڪوسيٽي سان).نتيجا ٽيبل 1 ۽ وڊيو S5 ۾ ڏيکاريا ويا آهن.اهو ڏسي سگهجي ٿو ته مختلف ويٽيبلٽي ۽ ويسڪوسيٽي جا مائع چيمبر ۾ بند ڪري سگھجن ٿا، ۽ جڏهن دٻاءُ لاڳو ڪيو وڃي ٿو، ته 5500 سي پي تائين ويسڪوسيٽي جا مائع به ڀر واري چيمبر ۾ منتقل ڪري سگھجن ٿا، جنهن ڪري اهو ممڪن آهي ته اعليٰ معيارن سان نمونن کي معلوم ڪرڻ. viscosity (يعني اسپتم، هڪ تمام ويسڪ نمونو جيڪو سانس جي بيمارين جي تشخيص لاء استعمال ڪيو ويندو آهي).
مٿين ملٽي فنڪشنل ڊسپينسنگ ڊوائيسز کي گڏ ڪرڻ سان، FAST-based POCT ڊوائيسز جو هڪ وسيع سلسلو ترقي ڪري سگهجي ٿو.هڪ مثال شڪل 1 ۾ ڏيکاريل آهي. ٻوٽي ۾ هڪ پري اسٽوريج چيمبر، هڪ ميڪنگ چيمبر، هڪ رد عمل چيمبر ۽ هڪ فضول چيمبر شامل آهي.ريجينٽس کي پري-اسٽوريج چيمبر ۾ وڌايل عرصي تائين ذخيرو ڪري سگھجي ٿو ۽ پوءِ ان کي ميڪنگ چيمبر ۾ خارج ڪيو وڃي.صحيح دٻاء سان، مخلوط ريڪٽرن کي منتخب طور تي فضول چيمبر يا رد عمل واري چيمبر ڏانهن منتقل ڪري سگهجي ٿو.
ڇاڪاڻ ته پي سي آر جي چڪاس پيٿوجنز کي ڳولڻ لاءِ سون جو معيار آهي جهڙوڪ H1N1 ۽ COVID-19 ۽ ان ۾ ڪيترائي رد عمل جا مرحلا شامل آهن، اسان پي سي آر جي سڃاڻپ لاءِ FAST-POCT پليٽ فارم کي ايپليڪيشن طور استعمال ڪيو.انجير تي.4 ڏيکاري ٿو PCR جاچ واري عمل کي FAST-POCT پليٽ فارم استعمال ڪندي.پهريون، ايلوٽنگ ريجينٽ، مقناطيسي مائڪرو بيڊ ريجينٽ، واش حل A، ۽ واش حل W کي ترتيب سان اڳ-اسٽوريج چيمبرز E، M، W1 ۽ W2 ۾ پائپ ڪيو ويو.آر اين اي جذب جا مرحلا تصوير ۾ ڏيکاريل آهن.4a ۽ ھيٺ ڏنل آھن: (1) جڏھن پريشر P1 (= 0.26 بار) لاڳو ڪيو ويندو آھي، نمونو چيمبر ايم ۾ ھليو ويندو آھي ۽ مڪسنگ چيمبر ۾ خارج ڪيو ويندو آھي.(2) ايئر پريشر P2 (= 0.12 بار) بندرگاهه A ذريعي فراهم ڪيو ويندو آهي جيڪو ملائڻ واري چيمبر جي تري سان ڳنڍيل آهي.جيتوڻيڪ ميلاپ جا ڪيترائي طريقا POCT پليٽ فارمن تي مائع ملاڻ جي صلاحيت ڏيکاريا آهن (مثال طور سرپينٽائن ميڪنگ 53، بي ترتيب ميلاپ 54 ۽ بيچ ميڪنگ 55)، انهن جي ميلاپ جي ڪارڪردگي ۽ تاثير اڃا به اطمينان بخش نه آهن.اهو بلبل ملائڻ جو طريقو اختيار ڪري ٿو، جنهن ۾ هوا کي مڪسنگ چيمبر جي تري ۾ داخل ڪيو وڃي ٿو ته جيئن مائع ۾ بلبل پيدا ٿئي، جنهن کان پوءِ طاقتور ڀور سيڪنڊن اندر مڪمل ميلاپ حاصل ڪري سگهي.بلبل ملائڻ جا تجربا ڪيا ويا ۽ نتيجا پيش ڪيا ويا ضمني شڪل S6 ۾.اهو ڏسي سگھجي ٿو ته جڏهن 0.10 بار جو دٻاء لاڳو ٿئي ٿو، مڪمل ميلاپ لڳ ڀڳ 8 سيڪنڊن ۾ لڳن ٿا.0.20 بار تائين دٻاء وڌائڻ سان، مڪمل ميلاپ تقريبا 2 سيڪنڊن ۾ حاصل ڪيو ويندو آهي.ميلاپ جي ڪارڪردگي کي ڳڻڻ جا طريقا طريقا سيڪشن ۾ پيش ڪيا ويا آهن.(3) موتي کي ڪڍڻ لاءِ روبيڊيم مقناطيس استعمال ڪريو، پوءِ ريٽيجنٽ کي فضول چيمبر ۾ منتقل ڪرڻ لاءِ پورٽ P ذريعي P3 (= 0.17 بار) کي دٻاءُ ڏيو.انجير تي.4b,c نموني مان نجاست کي هٽائڻ لاءِ ڌوئڻ جا قدم هن ريت ڏيکاري ٿو: (1) چيمبر W1 مان ڌوئڻ جو حل A کي پريشر ميڪنگ چيمبر P1 ۾ خارج ڪيو ويندو آهي.(2) پوءِ بلبل ملائڻ وارو عمل ڪريو.(3) ڌوئڻ جو حل A کي فضول مائع چيمبر ۾ منتقل ڪيو ويندو آهي، ۽ ميڪنگ چيمبر ۾ مائڪرو بيڊس کي مقناطيس ذريعي ڪڍيو ويندو آهي.ڌوئڻ W (Fig. 4c) ڌوئڻ A (Fig. 4b) وانگر هو.اها ڳالهه نوٽ ڪرڻ گهرجي ته هر ڌوئڻ قدم A ۽ W ٻه ڀيرا ڪيو ويو.شڪل 4d ظاهر ڪري ٿو آر اين اي کي بيڊز مان خارج ڪرڻ لاءِ خارج ٿيڻ جا مرحلا؛Elution ۽ mixing introduction steps ساڳيا آهن جيئن مٿي بيان ڪيل RNA جذب ۽ ڌوئڻ جا مرحلا.جيئن ته ايليوشن ريجينٽس PCR جي رد عمل واري چيمبر ۾ منتقل ڪيا ويندا آهن دٻاءُ هيٺ P3 ۽ P4 (=0.23 بار)، نازڪ دٻاءُ پي سي آر رد عمل واري چيمبر جي بازو کي سيل ڪرڻ لاءِ پهچي ويندو آهي.اهڙي طرح، P4 پريشر پڻ فضلي چيمبر ڏانهن گذرڻ کي سيل ڪرڻ ۾ مدد ڪري ٿو.اهڙيء طرح، تمام ايليوشن ريجنٽس کي برابر طور تي ورهايو ويو چار پي سي آر ردعمل چيمبرن ۾ ملٽي پلڪس پي سي آر جي رد عمل کي شروع ڪرڻ لاء.مٿي ڏنل طريقيڪار ضمني فلم S6 ۾ پيش ڪيو ويو آهي.
آر اين اي جذب ڪرڻ واري مرحلي ۾، نموني کي انليٽ M ۾ متعارف ڪرايو ويندو آهي ۽ اڳ ۾ ذخيرو ٿيل مالا حل سان گڏ ميڪنگ چيمبر ۾ داخل ڪيو ويندو آهي.داڻا ملائڻ ۽ ختم ڪرڻ کان پوءِ، ريجنٽ کي فضول چيمبر ۾ ورهايو ويندو آهي.b ۽ c ڌوئڻ جا مرحلا، مختلف اڳ-اسٽور ٿيل واش ريجينٽس کي مڪسنگ چيمبر ۾ متعارف ڪرايو، ۽ بيڊز کي ملائڻ ۽ هٽائڻ کان پوءِ، ريجينٽس کي فضول مائع چيمبر ۾ منتقل ڪريو.d Elution step: elution reagents متعارف ڪرائڻ، mixing and bead extracting کان پوءِ، ريجينٽس کي PCR رد عمل واري چيمبر ۾ منتقل ڪيو ويندو آهي.وکر مختلف مرحلن جي ڪم جي فلو ۽ لاڳاپيل پيٽرولن کي ڏيکاري ٿو.دٻاءُ اهو دٻاءُ آهي جيڪو انفرادي چيمبرن ذريعي ڪيو ويندو آهي.حجم مخلوط چيمبر ۾ مائع جو مقدار آهي.سڀ اسڪيل بار 1 سينٽي ميٽر آهن.خام ڊيٽا خام ڊيٽا فائلن جي طور تي مهيا ڪيل آهن.
هڪ پي سي آر ٽيسٽنگ جي طريقيڪار کي انجام ڏنو ويو ۽ ضمني شڪل S7 تھرمل پروفائلز کي پيش ڪري ٿو جنھن ۾ 20 منٽ ريورس ٽرانسپشن ٽائيم ۽ 60 منٽ تھرمل سائيڪلنگ ٽائيم (95 ۽ 60 ° C) شامل آھن، ھڪڙو حرارتي چڪر 90 s (ضمني فلم S7) آھي..FAST-POCT روايتي RT-PCR (هڪ حرارتي چڪر لاءِ 180 سيڪنڊن) جي ڀيٽ ۾ هڪ حرارتي چڪر (90 سيڪنڊ) مڪمل ڪرڻ لاءِ گهٽ وقت جي ضرورت آهي.اهو وضاحت ڪري سگهجي ٿو مٿاڇري واري علائقي کي حجم جي تناسب ۽ مائڪرو-پي سي آر رد عمل واري چيمبر جي گهٽ حرارتي جڙت جي ذريعي.چيمبر جي مٿاڇري 96.6 mm2 آھي ۽ چيمبر جو حجم 25 mm3 آھي، مٿاڇري کان حجم جي نسبت تقريبا 3.86 آھي.جيئن ته ضمني شڪل S10 ۾ ڏٺو ويو آهي، اسان جي پليٽ فارم جي پي سي آر ٽيسٽ واري علائقي ۾ پوئين پينل تي هڪ گروو آهي، پي سي آر چيمبر جي هيٺان کي 200 µm ٿلهو بڻائي ٿو.هڪ حرارتي طور تي هلائيندڙ لچڪدار پيڊ حرارتي ڪنٽرولر جي حرارتي مٿاڇري سان ڳنڍيل آهي، ٽيسٽ باڪس جي پوئتي سان سخت رابطي کي يقيني بڻائي.هي پليٽ فارم جي حرارتي جڙت کي گھٽائي ٿو ۽ حرارتي / کولنگ ڪارڪردگي کي بهتر بڻائي ٿو.حرارتي سائيڪل جي دوران، پليٽ فارم ۾ شامل پيرافين ڳري ٿو ۽ پي سي آر جي رد عمل واري چيمبر ۾ وهندو آهي، ريگينٽ جي بخارات ۽ ماحولياتي آلودگي کي روڪڻ لاءِ سيلنٽ طور ڪم ڪري ٿو (ڏسو ضمني فلم S8).
مٿي بيان ڪيل سڀ PCR ڳولڻ وارا عمل مڪمل طور تي خودڪار ڪيا ويا هڪ ڪسٽم ميڊ FAST-POCT اوزار استعمال ڪندي، جنهن ۾ هڪ پروگرام ٿيل پريشر ڪنٽرول يونٽ، هڪ مقناطيسي ايڪسٽريشن يونٽ، هڪ گرمي پد ڪنٽرول يونٽ، ۽ هڪ فلورسنٽ سگنل ڪيپچر ۽ پروسيسنگ يونٽ شامل آهن.نوٽ مان، اسان استعمال ڪيو FAST-POCT پليٽ فارم RNA جي اڪيلائي لاءِ ۽ پوءِ استعمال ڪيو ويو آر اين اي نمونن کي پي سي آر جي رد عمل لاءِ FAST-POCT سسٽم ۽ ڊيسڪ ٽاپ پي سي آر سسٽم جي مقابلي لاءِ.نتيجا لڳ ڀڳ ساڳيا هئا جيئن ضمني شڪل S8 ۾ ڏيکاريل آهي.آپريٽر هڪ سادي ڪم انجام ڏئي ٿو: نموني کي M-چيمبر ۾ متعارف ڪرايو ۽ پليٽ فارم کي اوزار ۾ داخل ڪري ٿو.مقدار جي امتحان جا نتيجا 82 منٽن ۾ دستياب آهن.FAST-POCT اوزار بابت تفصيلي ڄاڻ ملي سگھي ٿي ضمني شڪل ۾.C9، C10 ۽ C11.
انفلوئنزا A (IAV)، B (IBV)، C (ICV) ۽ D (IDV) وائرس جي ڪري پيدا ٿيندڙ انفلوئنزا هڪ عام عالمي رجحان آهي.انهن مان، IAV ۽ IBV سڀ کان وڌيڪ سخت ڪيسن ۽ موسمي وبائي مرضن جا ذميوار آهن، جيڪي دنيا جي 5-15 سيڪڙو آبادي کي متاثر ڪن ٿا، 3-5 ملين سخت ڪيس ۽ هر سال 290,000-650,000 موت جو سبب بڻجن ٿا.سانس جون بيماريون 56,57.IAV ۽ IB جي ابتدائي تشخيص بيماري ۽ لاڳاپيل معاشي بوجھ کي گهٽائڻ لاءِ ضروري آهي.موجود تشخيصي ٽيڪنڪ جي وچ ۾، ريورس ٽرانسڪرپٽ پوليمريز زنجير رد عمل (RT-PCR) سڀ کان وڌيڪ حساس، مخصوص، ۽ صحيح (>99٪) 58,59 سمجهيو ويندو آهي.موجود تشخيصي ٽيڪنڪ جي وچ ۾، ريورس ٽرانسڪرپٽ پوليمريز زنجير رد عمل (RT-PCR) سڀ کان وڌيڪ حساس، مخصوص، ۽ صحيح (>99٪) 58,59 سمجهيو ويندو آهي.Среди доступных диагностических методов полимеразная цепная реакция с обратной транскриптазой (ОТ-ПЦР) считаетевлеция чной и точной (> 99%)58,59.موجود تشخيصي طريقن مان، ريورس ٽرانسڪرپٽ پوليمرسيز چين جي رد عمل (RT-PCR) کي سڀ کان وڌيڪ حساس، مخصوص ۽ درست (> 99٪) 58,59 سمجهيو ويندو آهي. IS доступных диагностических методов полимеразная цепная реакция с обратной транскриптазой (ОТ-ПЦР) й и точной (>99%)58,59.موجود تشخيصي طريقن مان، ريورس ٽرانسڪرپٽ پوليميرس چين ريڪشن (RT-PCR) کي سڀ کان وڌيڪ حساس، مخصوص ۽ درست (>99٪) 58,59 سمجهيو ويندو آهي.جڏهن ته، روايتي RT-PCR طريقن کي بار بار پائپنگ، ملائڻ، ڊسپينشن ۽ سيال جي منتقلي جي ضرورت آهي، وسيلن جي محدود سيٽنگن ۾ پروفيسر طرفان انهن جي استعمال کي محدود ڪرڻ.هتي، FAST-POCT پليٽ فارم IAV ۽ IBV جي PCR جي ڳولا لاءِ استعمال ڪيو ويو، ترتيب سان، انهن جي هيٺئين حد جي نشاندهي (LOD) حاصل ڪرڻ لاءِ.ان کان علاوه، IAV ۽ IBV مختلف قسمن جي وچ ۾ فرق ڪرڻ لاءِ ملٽي پلڪس ڪيا ويا آهن، جينياتي تجزيي ۽ بيماري جي صحيح علاج ڪرڻ جي صلاحيت لاءِ هڪ پرعزم پليٽ فارم مهيا ڪن ٿا.
انجير تي.5a ڏيکاري ٿو HAV PCR جاچ جا نتيجا 150 μl صاف ٿيل وائرل RNA جي نموني طور استعمال ڪندي.انجير تي.5a (i) ڏيکاري ٿو ته 106 ڪاپيز / ايم ايل جي HAV ڪنسنٽريشن تي، فلوروسينس شدت (ΔRn) 0.830 تائين پهچي سگھي ٿو، ۽ جڏهن 102 نقلن / ml تائين ڪنسنٽريشن گھٽجي وڃي ٿي، ΔRn اڃا تائين 0.365 تائين پهچي سگھي ٿو، جيڪو انهي کان وڌيڪ آهي. جي خالي منفي ڪنٽرول گروپ (0.002)، اٽڪل 100 ڀيرا وڌيڪ.ڇهن آزاد تجربن جي بنياد تي مقدار جي تصديق لاءِ، IAV (Fig. 5a(ii))، R2 = 0.993، 102-106 copies/mL کان وٺي لاگ ڪنسنٽريشن ۽ سائيڪل جي حد (Ct) جي وچ ۾ هڪ لڪير calibration وکر ٺاهي وئي.نتيجا روايتي RT-PCR طريقن سان سٺي معاهدي ۾ آهن.انجير تي.5a (iii) FAST-POCT پليٽ فارم جي 40 چڪر کان پوءِ ٽيسٽ نتيجن جون فلورسنٽ تصويرون ڏيکاري ٿو.اسان ڏٺا ته FAST-POCT پليٽ فارم HAV کي گهٽ ۾ گهٽ 102 ڪاپيون / ايم ايل ڳولي سگهي ٿو.جڏهن ته، روايتي طريقي ۾ 102 ڪاپي / ايم ايل تي Ct قدر نه آهي، اهو تقريبا 103 ڪاپي / ايم ايل جي LOD ٺاهيندي.اسان اهو سمجهيو ته اهو ٿي سگهي ٿو بلبل ملائڻ جي اعلي ڪارڪردگي جي ڪري.پي سي آر ٽيسٽ تجربا ڪيا ويا پيوريفائيڊ IAV RNA تي مختلف ميڪنگ طريقن جو جائزو وٺڻ لاءِ، جنهن ۾ شيڪ ميڪنگ (ساڳي ملائڻ جو طريقو جيئن روايتي RT-PCR آپريشن ۾)، وائل ميڪسنگ (هي طريقو، 0.12 بار تي 3 s) ۽ ڪنٽرول گروپ جي طور تي ڪو ميلاپ ناهي. ..نتيجا ملي سگھن ٿا ضمني شڪل S12 ۾.اهو ڏسي سگهجي ٿو ته هڪ اعلي آر اين اي ڪنسنٽريشن (106 ڪاپيون/ايم ايل) تي، مختلف ملائڻ جي طريقن جي Ct قدر لڳ ڀڳ ساڳيا آهن جيئن بلبل ملائڻ لاءِ.جڏهن آر اين اي ڪنسنٽريشن 102 ڪاپيز/ ايم ايل تي گهٽجي ويو، شيڪ ميڪس ۽ ڪنٽرول ۾ ڪا به Ct قدر نه هئي، جڏهن ته بلبل ميڪس طريقو اڃا تائين 36.9 جي Ct قدر ڏني، جيڪا 38 جي Ct حد کان هيٺ هئي. نتيجن ۾ هڪ غالب ميلاپ جي خاصيت ڏيکاري ٿي. vesicles، جنهن جو مظاهرو ٻين ادب ۾ پڻ ڪيو ويو آهي، جيڪو شايد وضاحت ڪري سگهي ٿو ته FAST-POCT پليٽ فارم جي حساسيت روايتي RT-PCR کان ٿورو وڌيڪ آهي.انجير تي.5b 101 کان 106 ڪاپيز / ايم ايل تائين صاف ٿيل IBV RNA نموني جي PCR تجزيو جا نتيجا ڏيکاري ٿو.نتيجا IAV ٽيسٽ سان ملندڙ جلندڙ هئا، R2 = 0.994 حاصل ڪرڻ ۽ 102 ڪاپيون / ايم ايل جي LOD.
انفلوئنزا اي وائرس (IAV) جو هڪ پي سي آر تجزيو IAV ڪنسنٽريشن سان 106 کان 101 ڪاپيز / ايم ايل تائين TE بفر کي منفي ڪنٽرول (NC) طور استعمال ڪندي.(i) حقيقي وقت فلورسنس وکر.(ii) FAST ۽ روايتي جانچ جي طريقن لاءِ logarithmic IAV RNA ڪنسنٽريشن ۽ سائيڪل جي حد (Ct) جي وچ ۾ لڪير calibration وکر.(iii) IAV FAST-POCT فلورسنٽ تصوير 40 چڪر کان پوءِ.ب، انفلوئنزا بي وائرس (IBV) جي پي سي آر جو پتو لڳائڻ (i) حقيقي وقت فلورسنس اسپيڪٽرم سان.(ii) لڪير جي حساب سان وکر ۽ (iii) FAST-POCT IBV فلوروسينس تصوير 40 چڪر کان پوءِ.FAST-POCT پليٽ فارم استعمال ڪندي IAV ۽ IBV لاءِ معلوم ڪرڻ جي هيٺين حد (LOD) 102 ڪاپيون / ايم ايل هئي، جيڪا روايتي طريقن کان گهٽ آهي (103 ڪاپيون / ايم ايل).c ملٽيپلڪس ٽيسٽ جا نتيجا IAV ۽ IBV لاءِ.GAPDH هڪ مثبت ڪنٽرول طور استعمال ڪيو ويو ۽ TE بفر کي منفي ڪنٽرول طور استعمال ڪيو ويو ته ممڪن آلودگي ۽ پس منظر جي واڌاري کي روڪڻ لاء.چار مختلف نمونن جي قسمن ۾ فرق ڪري سگهجي ٿو: (1) GAPDH-صرف منفي نموني ("IAV-/IBV-")؛(2) IAV انفيڪشن ("IAV+/IBV-") IAV ۽ GAPDH سان؛(3) IBV انفيڪشن ("IAV-/IBV+") IBV ۽ GAPDH سان؛(4) IAV/IBV انفيڪشن (“IAV+/IBV+”) IAV، IBV ۽ GAPDH سان.ڊاٽ ٿيل لڪير حد جي لڪير جي نمائندگي ڪري ٿي.n = 6 حياتياتي طور تي آزاد تجربا ڪيا ويا، ڊيٽا ڏيکاريا ويا آهن ± معياري انحراف.خام ڊيٽا خام ڊيٽا فائلن جي طور تي پيش ڪيا ويا آهن.
انجير تي.5c IAV/IBV لاءِ ملٽي پلڪسنگ ٽيسٽ جا نتيجا ڏيکاري ٿو.هتي، وائرس ليسٽ کي صاف ٿيل آر اين اي جي جاء تي نموني حل طور استعمال ڪيو ويو، ۽ IAV، IBV، GAPDH (مثبت ڪنٽرول) ۽ TE بفر (منفي ڪنٽرول) لاء چار پرائمر FAST-POCT پليٽ فارم جي چار مختلف ردعمل چيمبرن ۾ شامل ڪيا ويا.ممڪن آلودگي ۽ پس منظر جي واڌاري کي روڪڻ لاءِ هتي مثبت ۽ منفي ڪنٽرول استعمال ڪيا ويا آهن.تجربن کي چئن گروپن ۾ ورهايو ويو: (1) GAPDH-منفي نموني ("IAV-/IBV-")؛(2) IAV-متاثر ٿيل ("IAV+/IBV-") بمقابله IAV ۽ GAPDH؛(3) IBV-.متاثر ٿيل ("IAV-") -/IBV+") IBV ۽ GAPDH؛(4) IAV/IBV (“IAV+/IBV+”) انفيڪشن IAV، IBV ۽ GAPDH سان.انجير تي.5c ڏيکاري ٿو ته جڏهن منفي نموني لاڳو ڪيا ويا، مثبت ڪنٽرول چيمبر جي فلورسنس شدت ΔRn 0.860 هئي، ۽ IAV ۽ IBV جي ΔRn منفي ڪنٽرول (0.002) سان ملندڙ جلندڙ هئي.IAV+/IBV-، IAV-/IBV+ ۽ IAV+/IBV+ گروپن لاءِ، IAV/GAPDH، IBV/GAPDH ۽ IAV/IBV/GAPDH ڪيمرائون ڏيکاريا ويا اھم فلوروسينس شدت، بالترتيب، جڏهن ته ٻيا ڪيمرا به ڏيکاريا فلورسنس جي شدت کي پس منظر ۾. حرارتي سائيڪل کان پوء 40 جي سطح.مٿين تجربن مان، FAST-POCT پليٽ فارم شاندار خصوصيت ڏيکاريو ۽ اسان کي اجازت ڏني ته هڪ ئي وقت مختلف انفلوئنزا وائرس جي پيٿوٽائپ.
FAST-POCT جي ڪلينڪل قابل اطلاق جي تصديق ڪرڻ لاء، اسان IB مريضن (n = 18) ۽ غير IB ڪنٽرولز (n = 18) (شڪل 6a) کان 36 ڪلينيڪل نمونن (نڪ سواب نموني) کي جانچيو.مريضن جي معلومات ضمني جدول 3 ۾ پيش ڪئي وئي آهي. IB انفيڪشن جي صورتحال آزاد طور تي تصديق ڪئي وئي هئي ۽ مطالعي جي پروٽوڪول جي جيانگ يونيورسٽي جي پهرين لاڳاپيل اسپتال (Hangzhou، Zhejiang) پاران منظور ڪئي وئي هئي.مريضن جي هر نموني کي ٻن ڀاڱن ۾ ورهايو ويو.ھڪڙو پروسيس ڪيو ويو FAST-POCT استعمال ڪندي ۽ ٻيو پروسيس ڪيو ويو ڊيسڪ ٽاپ پي سي آر سسٽم (SLAN-96P، چين).ٻئي گداز ساڳيا صاف ڪرڻ ۽ ڳولڻ واري کٽ استعمال ڪندا آهن.انجير تي.6b ڏيکاري ٿو FAST-POCT ۽ روايتي ريورس ٽرانسپشن پي سي آر (RT-PCR) جا نتيجا.اسان fluorescence شدت (FAST-POCT) جو -log2 (Ct) سان مقابلو ڪيو، جتي Ct روايتي RT-PCR لاءِ چڪر واري حد آهي.ٻنهي طريقن جي وچ ۾ سٺو معاهدو هو.FAST-POCT ۽ RT-PCR پيئرسن جي تناسب (r) جي 0.90 (شڪل 6b) جي قيمت سان مضبوط مثبت تعلق ڏيکاريو.اسان پوءِ FAST-POCT جي تشخيصي درستگي جو جائزو ورتو.فلورسنس شدت (FL) جي تقسيم مثبت ۽ منفي نموني لاء هڪ آزاد تجزياتي ماپ جي طور تي مهيا ڪئي وئي (Fig. 6c).FL قدر خاص طور تي IB مريضن ۾ ڪنٽرولن جي ڀيٽ ۾ وڌيڪ هئا (****P = 3.31 × 10-19؛ ٻه-ٽيل ٽي-ٽيسٽ) (تصوير 6d).اڳيون، IBV وصول ڪندڙ آپريٽنگ خاصيتون (ROC) وکر پلاٽ ڪيا ويا.اسان اهو معلوم ڪيو ته تشخيص جي درستگي تمام سٺي هئي، 1 جي وکر هيٺ ڏنل علائقي سان (Fig. 6e).مهرباني ڪري نوٽ ڪريو ته چين ۾ لازمي ماسڪ آرڊر ڪرڻ جي ڪري COVID-19 جي ڪري 2020 تائين، اسان IBD سان مريضن جي نشاندهي نه ڪئي آهي، تنهن ڪري سڀ مثبت ڪلينڪ نموني (يعني، نڪ جي سواب جا نمونا) صرف IBV لاءِ هئا.
ڪلينڪ مطالعي جي ڊيزائن.مجموعي طور تي 36 نمونا، جن ۾ 18 مريضن جا نمونا ۽ 18 غير انفلوئنزا ڪنٽرول شامل آهن، FAST-POCT پليٽ فارم ۽ روايتي RT-PCR استعمال ڪندي تجزيو ڪيو ويو.b FAST-POCT PCR ۽ روايتي RT-PCR جي وچ ۾ تجزياتي تسلسل جو اندازو لڳايو.نتيجا مثبت طور تي لاڳاپا هئا (پيئرسن آر = 0.90).c 18 IB مريضن ۽ 18 ڪنٽرولن ۾ فلورسنس شدت جي سطح.d IB مريضن ۾ (+)، FL قدر خاص طور تي ڪنٽرول گروپ (-) جي ڀيٽ ۾ وڌيڪ هئا (****P = 3.31 × 10-19؛ ٻه-ٽيل ٽي-ٽيسٽ؛ n = 36).هر چورس پلاٽ لاءِ، مرڪز ۾ ڪارو نشان وچين جي نمائندگي ڪري ٿو، ۽ دٻي جي هيٺيون ۽ مٿيون لائينون ترتيب سان 25 هين ۽ 75 صديءَ جي نمائندگي ڪن ٿيون.ويسڪرز گهٽ ۾ گهٽ ۽ وڌ ۾ وڌ ڊيٽا پوائنٽ تائين وڌندا آهن، جن کي ٻاهر نه سمجهيو ويندو آهي.e ROC وکر.ڊاٽ ٿيل لائن ڊي نمائندگي ڪري ٿي حد جي قيمت جو اندازو لڳايو ويو ROC تجزيي مان.IBV لاءِ AUC 1 آهي. خام ڊيٽا خام ڊيٽا فائلن جي طور تي مهيا ڪئي وئي آهي.
هن آرٽيڪل ۾، اسان FAST پيش ڪريون ٿا، جيڪي خاصيتون آهن هڪ مثالي POCT لاءِ گهربل.اسان جي ٽيڪنالاجي جي فائدن ۾ شامل آهن: (1) ورسٽائل ڊاسنگ (ڪاسڪيڊ، هڪ ئي وقت، ترتيب وار ۽ چونڊ)، طلب تي ڇڏڻ (تيز ۽ متناسب طور تي لاڳو ٿيل پريشر) ۽ قابل اعتماد آپريشن (وائبريشن 150 درجا تي) (2) ڊگهي مدت اسٽوريج (2 سال تيز ٽيسٽنگ، وزن گھٽائڻ بابت 0.3٪)؛(3) مائع سان ڪم ڪرڻ جي صلاحيت وسيع رينج سان گڏ ويٽبلٽي ۽ ويسڪوسيٽي (5500 سي پي تائين ويسڪوسيٽي)؛(4) اقتصادي (تخميني مادي قيمت FAST-POCT PCR ڊيوائس جي لڳ ڀڳ US$1 آهي).ملٽي فنڪشنل ڊسپينسرن کي گڏ ڪرڻ سان، انفلوئنزا A ۽ B وائرس جي PCR جي سڃاڻپ لاءِ هڪ مربوط FAST-POCT پليٽ فارم جو مظاهرو ڪيو ويو ۽ لاڳو ڪيو ويو.FAST-POCT صرف 82 منٽ وٺندو آهي.36 نڪ جي swab جي نمونن سان گڏ ڪلينڪل ٽيسٽ معياري RT-PCR (Pearson coefficients> 0.9) سان فلوروسينس شدت ۾ سٺي مطابقت ڏيکاريا.36 نڪ جي swab جي نمونن سان گڏ ڪلينڪل ٽيسٽ معياري RT-PCR (Pearson coefficients> 0.9) سان فلوروسينس شدت ۾ سٺي مطابقت ڏيکاريا.Клинические тесты с 36 образцами мазков из носа показали хорошее соответствие интенсивности-Плуоресценции флуоресценции стан irsona > 0,9).نڪ جي swabs جي 36 نمونن سان ڪلينڪل ٽيسٽ معياري RT-PCR (Pearson’s coefficients> 0.9) جي فلوروسينس شدت سان سٺو معاهدو ڏيکاريو.RT-PCR Клинические испытания 36 образцов мазков из носа показали хорошее совпадение интенсивности флуоресценции со irsona > 0,9).36 نڪ جي swab جي نمونن جي ڪلينڪ ٽيسٽ معياري RT-PCR (Pearson's coefficient> 0.9) سان فلوروسينس جي شدت جو سٺو معاهدو ڏيکاريو.هن ڪم سان متوازي ۾، مختلف اڀرندڙ بايو ڪيميڪل طريقا (مثال طور، پلازما تھرمل سائيڪلنگ، ايمپليفڪيشن فري اموناساسي، ۽ نانوبوڊي فنڪشنلائيزيشن اسيس) POCT ۾ پنھنجي صلاحيت ڏيکاريا آھن.جڏهن ته، مڪمل طور تي مربوط ۽ مضبوط POCT پليٽ فارم جي کوٽ جي ڪري، انهن طريقن کي لازمي طور تي الڳ الڳ پروسيسنگ پروسيسنگ جي ضرورت آهي (مثال طور، RNA isolation44، incubation45 and washing46)، جيڪي انهن طريقن سان موجوده ڪم کي وڌيڪ مڪمل ڪن ٿا انهن طريقن سان جديد POCT افعال کي لاڳو ڪرڻ لاءِ. گهربل پيراگراف.آڻڻ-۾-جواب-آئوٽ پٽ ڪارڪردگي.ھن ڪم ۾، جيتوڻيڪ FAST والو کي چالو ڪرڻ لاءِ استعمال ٿيندڙ ايئر پمپ ڪافي ننڍو آھي جيڪو ھڪ بينچ ٽاپ اوزار (Fig. S9, S10) ۾ ضم ٿيڻ لاءِ آھي، اھو اڃا تائين وڏي طاقت استعمال ڪري ٿو ۽ شور پيدا ڪري ٿو.اصولي طور تي، ننڍا فارم فيڪٽر نيوميٽڪ پمپن کي ٻين ذريعن سان تبديل ڪري سگهجي ٿو، جهڙوڪ برقي مقناطيسي قوت جو استعمال يا آڱر جي عمل.وڌيڪ سڌارن ۾ شامل ٿي سگھي ٿو، مثال طور، مختلف ۽ مخصوص بايو ڪيميڪل اسيسز لاءِ ڪِٽس کي ترتيب ڏيڻ، نئين سڃاڻپ جا طريقا استعمال ڪندي جن کي گرم ڪرڻ/کولنگ سسٽم جي ضرورت نه آهي، اهڙيءَ طرح PCR ايپليڪيشنن لاءِ هڪ ٽول فري POCT پليٽ فارم مهيا ڪري ٿي.اسان يقين رکون ٿا ته FAST پليٽ فارم مائع کي هٿي وٺائڻ جو هڪ طريقو مهيا ڪري ٿو، اسان يقين رکون ٿا ته تجويز ڪيل FAST ٽيڪنالاجي هڪ عام پليٽ فارم ٺاهڻ جي صلاحيت پيش ڪري ٿي نه رڳو بايوميڊيڪل ٽيسٽ لاء، پر ماحولياتي نگراني، کاڌي جي معيار جي جانچ، مواد ۽ دوا جي جوڙجڪ لاء. ..
انساني نڪ جي swab جي نمونن جي گڏ ڪرڻ ۽ استعمال جي منظوري ڏني وئي آهي اخلاقي ڪميٽي جي جيانگ يونيورسٽي جي پهرين لاڳاپيل اسپتال (IIT20220330B).36 نڪ جي swab جا نمونا گڏ ڪيا ويا، جن ۾ 16 بالغ <30 سال، 7 بالغ> 40 سالن جي عمر، ۽ 19 مرد، 17 عورتون شامل آهن.36 نڪ جي swab جا نمونا گڏ ڪيا ويا، جن ۾ 16 بالغ <30 سال، 7 بالغ> 40 سالن جي عمر، ۽ 19 مرد، 17 عورتون شامل آهن.Было собрано 36 образцов мазков из носа, в которых приняли участие 16 взрослых < 30 лет, 7 взрослых старще , 40 ж19ж7ул.30 سالن کان گهٽ عمر وارن 16 بالغن، 40 سالن کان مٿي جي 7 بالغن، 19 مردن ۽ 17 عورتن کان 36 ناسي سواب جا نمونا گڏ ڪيا ويا..ڊيموگرافڪ ڊيٽا ضمني جدول 3 ۾ پيش ڪيا ويا آهن. ڄاڻايل رضامندي سڀني شرڪت ڪندڙن کان حاصل ڪئي وئي.سڀني شرڪت ڪندڙن کي انفلوئنزا هجڻ جو شڪ ڪيو ويو ۽ بغير معاوضي جي رضاڪارانه طور تي آزمايو ويو.
فاسٽ بيس ۽ لِڊ پوليليٽيڪڪ ايسڊ (PLA) مان ٺهيل آهن ۽ Ender 3 Pro 3D پرنٽر (Shenzhen Transcend 3D Technology Co., Ltd.) طرفان ڇپيل آهن.ٻه طرفي ٽيپ Adhesives Research, Inc. ماڊل 90880 کان خريد ڪئي وئي. PET فلم 100 µm ٿلهي McMaster-Carr کان خريد ڪئي وئي.ٻنهي چپپڻ واري ۽ پي اي ٽي فلم کي سلائيٽ ڪيميو 2 ڪٽر استعمال ڪندي سلائيٽ آمريڪا، Inc کان ڪٽيو ويو. لچڪدار فلم PDMS مواد مان ٺهيل آهي انجيڪشن مولڊنگ ذريعي.پهريون، هڪ 200 µm ٿلهو PET فريم هڪ ليزر سسٽم استعمال ڪندي ڪٽيو ويو ۽ 100 µm ڊبل رخا چپپڻ واري ٽيپ استعمال ڪندي 3 ملي ميٽر ٿلهي PMMA شيٽ تي چمڪيو ويو.PDMS اڳوڻو (Sylgard 184؛ حصو A: حصو B = 10: 1، ڊو ڪارننگ) پوءِ مولڊ ۾ وجھو ويو ۽ اضافي PDMS کي ختم ڪرڻ لاءِ شيشي جي راڊ کي استعمال ڪيو ويو.70 ° C. تي 3 ڪلاڪن تائين علاج ڪرڻ کان پوء، 300 μm ٿلهي PDMS فلم کي مولڊ مان صاف ڪري سگھجي ٿو.
ورسٽائل ورهائڻ، آن ڊيمانڊ پبلشنگ ۽ قابل اعتماد ڪارڪردگي لاءِ تصويرون تيز رفتار ڪيمرا (سوني AX700 1000 fps) سان ورتيون ويون آهن.معتبر ٽيسٽ ۾ استعمال ٿيل مدار شيڪر SCILOGEX (SCI-O180) کان خريد ڪيو ويو.ايئر پريشر هڪ ايئر ڪمپريسر پاران ٺاهيل آهي، ۽ ڪيترن ئي ڊجيٽل صحت واري دٻاء ريگيوليٽر کي دٻاء جي قيمت کي ترتيب ڏيڻ لاء استعمال ڪيو ويندو آهي.وهڪري جي رويي جي جاچ واري عمل هيٺ ڏنل آهي.ٽيسٽ ڊيوائس ۾ سيال جو اڳواٽ مقرر ڪيل مقدار داخل ڪيو ويو ۽ وهڪري جي رويي کي رڪارڊ ڪرڻ لاءِ تيز رفتار ڪئميرا استعمال ڪيو ويو.اڃا تصويرون پوءِ مقرر وقتن تي وهڪري جي رويي جي وڊيوز مان ورتيون ويون، ۽ باقي علائقي کي تصويري-پرو پلس سافٽ ويئر استعمال ڪندي ڳڻيو ويو، جنهن کي پوءِ حجم کي ڳڻڻ لاءِ ڪئميرا جي کوٽائي سان ضرب ڪيو ويو.وهڪري جي رويي جي جاچ واري نظام جا تفصيل ضمني شڪل S4 ۾ ڳولهي سگهجن ٿا.
50 µl مائڪرو بيڊس ۽ 100 µl ڊيونائيزڊ پاڻي کي شيشي جي ميلاپ واري ڊوائيس ۾ لڳايو.0.1 بار، 0.15 بار ۽ 0.2 بار جي دٻاءَ تي هر 0.1 سيڪنڊن تي تيز رفتار ڪئميرا سان گڏ ٿيل ڪارڪردگي جون تصويرون ورتيون ويون.ڦوٽو پروسيسنگ سافٽ ويئر (فوٽوشاپ CS6) استعمال ڪندي انهن تصويرن مان ميلاپ جي عمل دوران پکسل جي معلومات حاصل ڪري سگهجي ٿي.۽ ملائڻ جي ڪارڪردگي هيٺين مساوات 53 سان حاصل ڪري سگھجي ٿي.
جتي M ملائڻ جي ڪارڪردگي آهي، N نموني پکسلز جو ڪل تعداد آهي، ۽ ci ۽ \(\bar{c}\) عام ۽ متوقع عام ڪنسنٽريشن آهن.ميلاپ جي ڪارڪردگي جي حد 0 (0٪، اڻ مليل) کان 1 (100٪، مڪمل طور تي مخلوط) تائين.نتيجا ڏيکاريا ويا آهن ضمني شڪل S6 ۾.
IAV ۽ IBV لاءِ ريئل ٽائيم RT-PCR کٽ، بشمول IAV ۽ IBV RNA نمونا (cat. no. RR-0051-02/RR-0052-02, Liferiver, China), Tris-EDTA بفر (TE بفر نمبر. B541019) سانگون بايوٽيڪ، چين)، مثبت ڪنٽرول آر اين اي پيوريفڪيشن کٽ (حصو نمبر Z-ME-0010، Liferiver، China) ۽ GAPDH حل (حصو نمبر M591101، سانگون بايوٽيڪ، چين) تجارتي طور تي دستياب آهن.آر اين اي صاف ڪرڻ واري کٽ ۾ هڪ بائنڊنگ بفر، واش A، واش W، ايليوئنٽ، مقناطيسي مائڪرو بيڊس، ۽ هڪ ايڪريل ڪيريئر شامل آهن.IAV ۽ IBV حقيقي وقت RT-PCR کٽ شامل آهن IFVA nucleic acid PCR ڳولڻ جو ميلاپ ۽ RT-PCR اينزيم.6 µl AcrylCarrier ۽ 20 µl مقناطيسي موتي کي 500 µl بائنڊنگ بفر سلوشن ۾ شامل ڪريو، چڱيءَ طرح ڇڪيو ۽ پوءِ مالا جو حل تيار ڪريو.واش A ۽ W ۾ 21 ملي ايل ايٿانول شامل ڪريو، چڱيء طرح ڌوء ته ڌوئي A ۽ W جو حل حاصل ڪريو.پوءِ، 18 µl فلورسنٽ پي سي آر جو مرکب IFVA نيوڪليڪ ايسڊ سان ۽ 1 µl RT-PCR اينزيم کي 1 µl TE محلول ۾ شامل ڪيو ويو، ڪيترن ئي سيڪنڊن لاءِ ڇڪيو ۽ سينٽرفيوج ڪيو ويو، 20 µl IAV ۽ IBV پرائمر حاصل ڪري.
هيٺ ڏنل آر اين اي صاف ڪرڻ جي عمل تي عمل ڪريو: (1) آر اين اي جذب.526 µl pellet محلول کي 1.5 ml سينٽرفيوج ٽيوب ۾ پائيپٽ ڪريو ۽ 150 µl نموني شامل ڪريو، پوءِ دستي طور تي ٽيوب کي 10 ڀيرا مٿي ۽ هيٺ ڪريو.60 سيڪنڊن لاءِ 1.88 x 104 g تي 676 µl مرکب کي لاڳاپي واري ڪالمن ۽ سينٽرفيوج ۾ منتقل ڪريو.ان کان پوءِ ايندڙ نالن کي رد ڪيو وڃي ٿو.(2) ڌوئڻ جو پهريون مرحلو.500 µl واش حل A کي لاڳاپي واري ڪالمن ۾ شامل ڪريو، 40 s لاءِ 1.88 x 104 g تي سينٽرفيوج ڪريو، ۽ خرچ ٿيل حل کي رد ڪريو.هن ڌوئڻ جو عمل ٻه ڀيرا بار بار ڪيو ويو.(3) ڌوئڻ جو ٻيو مرحلو.500 µl واش محلول W کي لاڳاپي واري ڪالمن ۾ شامل ڪريو، 15 s لاءِ 1.88×104 g تي سينٽرفيوج ڪريو ۽ خرچ ٿيل حل کي رد ڪريو.هن ڌوئڻ جو عمل ٻه ڀيرا بار بار ڪيو ويو.(4) ايليوشن.200 µl ايليوئيٽ شامل ڪريو لاڳاپي واري ڪالمن ۾ ۽ سينٽرفيوج کي 1.88 x 104 گ تي 2 منٽ لاءِ.(5) RT-PCR: ايليويٽ کي پي سي آر ٽيوب ۾ پرائمر حل جي 20 μl ۾ داخل ڪيو ويو، پوءِ ٽيوب کي ريئل ٽائيم پي سي آر ٽيسٽ اپريٽس (SLAN-96P) ۾ رکيو ويو ته جيئن RT-PCR عمل کي انجام ڏئي.پوري چڪاس واري عمل ۾ لڳ ڀڳ 140 منٽ لڳن ٿا (20 منٽ آر اين اي صاف ڪرڻ لاءِ ۽ 120 منٽ پي سي آر جي چڪاس لاءِ).
526 µl مالا جو حل، 1000 µl واش محلول A، 1000 µl واش محلول W، 200 µl ايليويٽ ۽ 20 µl پرائمر حل ابتدائي طور شامل ڪيو ويو ۽ چيمبرز M, W1, W2, E ۽ PCR جي چڪاس واري چيمبر ۾ محفوظ ڪيو ويو.پليٽ فارم اسيمبلي.ان کان پوء، نموني جو 150 μl چيمبر ايم ۾ پائپ ڪيو ويو ۽ FAST-POCT پليٽ فارم کي ضمني شڪل S9 ۾ ڏيکاريل ٽيسٽ اوزار ۾ داخل ڪيو ويو.اٽڪل 82 منٽن کان پوء، امتحان جا نتيجا موجود هئا.
جيستائين ٻي صورت ۾ نوٽ ڪيو وڃي، سڀئي امتحان جا نتيجا پيش ڪيا ويندا آهن مطلب ± SD کان پوءِ گهٽ ۾ گهٽ ڇهن نقلن کان پوءِ صرف FAST-POCT پليٽ فارم ۽ حياتياتي طور تي آزاد نموني استعمال ڪندي.ڪابه ڊيٽا تجزيي کان خارج نه ڪئي وئي.تجربا بي ترتيب نه آهن.محقق تجربي دوران گروپ جي ڪمن کان انڌا نه هئا.
مطالعي جي ڊيزائن تي وڌيڪ معلومات لاء، ڏسو فطرت ريسرچ رپورٽ خلاصو هن مضمون سان ڳنڍيل آهي.
هن مطالعي جي نتيجن جي حمايت ڪندڙ ڊيٽا اضافي معلومات ۾ موجود آهن.هي آرٽيڪل اصل ڊيٽا مهيا ڪري ٿو.
Chagla, Z. & Madhukar, P. COVID-19 بوسٽر امير قومن ۾ سڀني لاءِ ويڪسين ۾ دير ڪندا.Chagla, Z. & Madhukar, P. COVID-19 بوسٽر امير قومن ۾ سڀني لاءِ ويڪسين ۾ دير ڪندا.چاگلا، Z. ۽ Madhukar، P. COVID-19 بوسٽر امير ملڪن ۾ هر ڪنهن لاءِ ويڪسين ٺاهڻ ۾ دير ڪندا.چاگلا، Z. ۽ Madhukar، P. COVID-19 ريويڪسينيشن امير ملڪن ۾ هر ڪنهن لاءِ ويڪسينيشن ۾ دير ڪندي.قومي دوا.27، 1659-1665 (2021).
فاسٽ، ايل وغيره.SARS-CoV-2 ٽيسٽنگ گهٽ ۽ وچين آمدني وارن ملڪن ۾: خانگي صحت جي سارسنڀال واري شعبي ۾ دستيابي ۽ سستي.microbial انفيڪشن.22، 511-514 (2020).
عالمي صحت جو ادارو.چونڊيل قابل علاج جنسي طور تي منتقل ٿيل انفڪشنس جي عالمي پيماني تي ۽ واقعا: هڪ جائزو ۽ تخمينو.جنيوا: WHO, WHO/HIV_AIDS/2 https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/66818/WHO_HIV_AIDS_2001.02.pdf (2001).
Fenton, EM et al.گھڻن 2D ٺهيل سائڊ فلو ٽيسٽ پٽي.ASS ايپليڪيشن.الما ميٽر.انٽر ملان.1، 124-129 (2009).
شلنگ، ڪي ايم وغيره.مڪمل طور تي بند ٿيل microfluidic پيپر تي ٻڌل تجزياتي ڊوائيس.مقعدڪيميائي.84، 1579-1585 (2012).
ليپينٽر، اين ايٽ ال.مقابلي واري پيپر تي ٻڌل اميونوڪروميٽوگرافي سان گڏ اينزيم-تبديل ٿيل اليڪٽروڊس وائرليس مانيٽرنگ ۽ پيشاب ڪوٽينائن جي اليڪٽرڪ ڪيميڪل عزم جي اجازت ڏئي ٿي.سينسر 21، 1659 (2021).
Zhu، X. et al.گلوڪووميٽر استعمال ڪندي هڪ ورسٽائل نانوزيم-انٽيگريٽڊ ليٽرل فلوئڊ پليٽ فارم سان بيماري بائيو مارڪرز کي مقدار ڏيڻ.حياتياتي سينسر.بايو اليڪٽرانڪس.126، 690-696 (2019).
بو، ايس وغيره.حمل جي امتحان واري پٽي pathogenic بيڪٽيريا جي سڃاڻپ لاءِ concanavalin A-human chorionic gonadotropin-Cu3(PO4)2 هائبرڊ نانو فلاورز، مقناطيسي علحدگي ۽ سمارٽ فون ريڊنگ استعمال ڪندي.مائڪرو ڪمپيوٽر.رسالو.185، 464 (2018).